養(yǎng)殖場用非洲豬瘟檢測試劑盒[風途耗材介紹]FT-ZWSJ2 Sada na zis?ovanie afrického moru o?ípanych pre farmy養(yǎng)殖場用非洲豬瘟檢測試劑盒[風途耗材介紹]FT-ZWSJ2：ASF沒有相應的治療措施和有效的疫苗,對于該病的控制主要依賴快速實驗室診斷和嚴格的防控措施。因此,建立ASF快速、準確的診斷方法尤為重要。1921年,非洲豬瘟早在肯尼亞報道,引起家豬100%的死亡。此后,該病一直在非洲流行,直到1957年,由于給豬飼喂航班上的垃圾和剩余食物引起該病在葡萄牙的爆發(fā)[6]。非洲豬瘟隨后在歐洲的其他一些國家蔓延,包括馬耳他(1978)、意大利(1967、1980)、法國(1964、1967、1977)、比利時(1985)和荷蘭(1986)。

　　核酸DNA提取試劑盒(柱膜法)使用說明書

　　【產(chǎn)品名稱】

　　通用名稱：病毒DNA提取試劑盒

　　英文名稱：Extraction Kit for Virus DNA

　　【預期用途】

　　本試劑盒主要用于疑似病毒等病原感染抗凝血、血淸、拭子、組織、飼料及環(huán)境中的病毒DNA的提取，純化的核酸可適用于各種常規(guī)操作及PCR試驗。

　　【試劑盒組分】

　　I、試劑盒組成及貯藏條件

　　2、 保存條件及有效期：室溫下保存，有效期12個月.

　　3、 需自備材料：無水乙醇、1.5 mL無菌離心管、1.5 mL無菌離心管(長臂型)、生理鹽水、研缽、無菌

　　1mL, 2OOuL、10uL槍頭、記號筆等。

　　【操作步驟】

　　一、樣品制備

　　1、 血液樣品：抗凝血樣品置離心管中，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上層血漿;非抗凝血樣品置離心  管中，待凝固后，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上層血清，置于滅菌離心管中，編號待檢。

　　2、 組織樣品：采集脾臟、肝臟、淋巴結(jié)、扁桃體等病變組織樣品0.1g.組織勻漿器或研缽中充分勻漿或研磨，加入1  mL生理鹽水混勻，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上清于滅菌離心骨中，編號待檢。

　　3、 口腔液：進食前用拭子/口腔液采集袋或自制棉線綁紗布團吸引動物咀嚼，收集口腔液大于 500uL，  8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上清于滅菌離心管中，編號待檢。

　　4、 飼料：取適量研磨后的飼料(約0.2g)，放入含1 mL生理鹽水或PBS(PH為7.4)緩沖液的2 mL EP  管屮，振蕩混勻，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上清于滅菌離心管中,編號待檢.

　　5、 灰塵：用無菌棉簽蘸取適量環(huán)境表面上的灰塵，放入含1 mL生理鹽水或PBS(PH為7.4)緩沖液的2 mL  EP管中，振蕩混勻，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上清于滅菌離心管中，編號待檢。

　　二、DNA的提取

　　1、取裂解液200uL加入無核酸酶1.5 mL離心曾屮，分別加入血漿/血清/組織液等樣品液200uL.  震蕩混勻10秒或顛倒混勻10次，室溫放置5分鐘(如果室內(nèi)溫度較低時.需放置25C水浴溫育)，再加入200uL無水乙醇，顛倒混勻10秒;若樣品渾濁則先12000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘處理，取上清液，以避免堵塞柱子;

　　2、 將液體轉(zhuǎn)入套有收集管的吸附柱中， 12000rpm離心1分鐘：

　　3、 棄收集管液體，向吸附柱中加600uL洗液I , 12000 rpm離心1分鐘;

　　4、 棄收集管液體，向吸附柱中加600uL洗液II， 12000 rpm離心I分鐘;

　　5、 棄收集管液體，12000 rpm離心2分鐘，以*去除殘留洗液;

　　6、將吸附柱轉(zhuǎn)入新的無核酸酸1.5mLEP管(長臂型)中，向柱中央滴加50 uL洗脫液，靜置1分鐘, 12000  rpm離心1分鐘，EP管中液體即為病毒DNA。

　　【注意事項】

　　1、 實驗前諾仔細閱讀本試劑盒說明書，嚴格按照操作步驟執(zhí)行.在操作過程中對時間、試劑體積等 粘確控制可以獲得好的結(jié)果。

　　2, 樣本應新鮮采集使用，或低溫運輸儲存;

　　3, 樣本具有潛在感染風險，核酸的提取應在核酸提取實驗室的生物安全柜中進行。

　　4、 核酸提取冇關(guān)耗材確保高溫滅菌，提取后核酸盡快進入下一步試驗或冷凍保存待用。

　　5, 試劑使用前應混合均勻，試劑具有一定腐蝕性，使用時請戴手套、做好防護。

　　6. 低溫下裂解液出現(xiàn)結(jié)晶數(shù)屬正常現(xiàn)象，可在60°C水浴加熱助溶后使用。

　　7、 實驗產(chǎn)生的廢棄物應及時收集，遠離PCR實驗室進行無害化處理。